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直擴(kuò)型Taq DNA聚合酶說明書

更新時間:2023-10-24      點擊次數(shù):527

直擴(kuò)型Taq DNA聚合酶說明書

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產(chǎn)品詳情

Taq-D DNA聚合酶(KlenTaq),是大腸桿菌重組表達(dá)的嗜熱細(xì)菌Thermus aquaticus來源的外切酶缺失型Taq DNA聚合酶(刪除了5’ 外切酶結(jié)構(gòu)域)。該酶具有5’→3’聚合酶活性,無5’→3’外切酶活性和3’→5’外切酶活性。擴(kuò)增產(chǎn)物具有3'-dA尾巴。不可用于Taqman探針法q-PCR。本酶經(jīng)基因工程改造,尤其適合于溶解曲線法單核苷酸多態(tài)性(SNP)分型。擴(kuò)增片段的長度可達(dá)3 kb。延伸速度為1.0 kb/ min(72℃)。

特點

濃度2.5U/μl活性定義

以大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,在72℃、30 min內(nèi),將10 nmol脫氧核糖核苷酸摻入到酸不溶物中所需的酶量,定義為一個活性單位(U)。

酶貯存緩沖液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween 20, and 50% glycerol。

產(chǎn)品包裝規(guī)格及組成

Component

78DC10011--500u


78DC10011--2500u78DC10011--10000u78DC10011--25000U

Taq-D DNA聚合酶

KlenTaq

500U

500U×5

2500U×4

2500U×10

10×Taq-D Buffer

1.0 ml×1

1.0 ml×5

5.0 ml×4

5.0 ml×10

運(yùn)輸與保存

-20℃保存 冰袋運(yùn)輸

適用范圍

應(yīng)用舉例

以下反應(yīng)舉例為50 μl標(biāo)準(zhǔn)PCR體系, 僅供參考。實際PCR條件應(yīng)根據(jù)模板、引物、目的片段大小加以優(yōu)化,確定最佳反應(yīng)條件。

組份

體積/μl

終濃度

10×Taq-D Buffer

5

dNTPs(2.0 mM)

5

0.2 mM

引物F(10 μM)

1.5

0.3 μM

引物R(10 μM)

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

Taq-D(2.5U/μl)

1.0

2.5U

ddH2O

Varable

/

總體積

50

/


*DNA template可參照如下標(biāo)準(zhǔn)(50 μl PCR體系):

l 人類基因組DNA

0.1 μg-1 μg

l λDNA

0.5 ng-5 ng

l 質(zhì)粒DNA

0.01 ng-1 ng

l 大腸桿菌DNA

10 ng-100 ng

PCR反應(yīng)條件

95℃

5 min


95℃

15 sec


55~72℃

20 sec

30 Cycles

72℃

1-2 kb/min


72℃

5 min


注意事項

質(zhì)量控制

相關(guān)測試表明無外源內(nèi)切酶或外切脫氧核糖核酸酶污染。PCR方法檢測無宿主殘余DNA,能有效擴(kuò)增人基因組中的單拷貝基因。

室溫放置一周,擴(kuò)增活性無明顯改變;但強(qiáng)烈建議不要在室溫下長期放置,用畢放回-20度。



貨號品名規(guī)格品牌
78DC10011-500U直擴(kuò)型Taq DNA聚合酶500U

BIOHUB

78DC10011-500U×5直擴(kuò)型Taq DNA聚合酶500U×5

BIOHUB

78DC10011-2500U×4直擴(kuò)型Taq DNA聚合酶2500U×4

BIOHUB

78DC10011-2500U×10直擴(kuò)型Taq DNA聚合酶2500U×10

BIOHUB








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