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HE染液說明書

更新時間:2023-10-24      點(diǎn)擊次數(shù):406

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產(chǎn)品描述
HE染色,即蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色,是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用zui廣泛的技術(shù)方法。蘇木素染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)、胞質(zhì)內(nèi)的核酸著藍(lán)色至藍(lán)紫色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色可用于觀察比較正常組織與病變組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),可初步確定或鑒別病變組織、細(xì)胞中出現(xiàn)的異常物質(zhì)。經(jīng)本產(chǎn)品HE染液染色的組織或細(xì)胞,細(xì)胞核呈藍(lán)色至藍(lán)紫色,細(xì)胞漿呈紅色,胞漿與胞核對比鮮明。
產(chǎn)品組分

組成

Component

78GD10081-100mL

78GD10081-500ML

蘇木素染液

100 mL

500 mL

伊紅染液(醇溶)

100 mL

500 mL

使用方法
使用方法

1. 樣本前處理

(1) 對于石蠟切片:切片依次經(jīng)二甲苯脫蠟10 min,更換新鮮的二甲苯脫蠟10 min,無水乙醇 5min,新鮮無水乙醇5 min,90%乙醇5 min,75%乙醇5 min,自來水洗。

(2) 對于冰凍切片:-20℃保存的冰凍切片需靜置5-10 min恢復(fù)至室溫。如需固定,則經(jīng)所需固定液室溫后自來水洗。

2. HE染色

(1) 蘇木素染色:上述處理好的切片,進(jìn)入蘇木素染液染色3-5 min,自來水洗;

(2) 分化:切片經(jīng)蘇木素分化液2-5 s,自來水流水充分沖洗;

(3) 返藍(lán):蘇木素返藍(lán)液返藍(lán)2-5 s,自來水流水充分沖洗;

(4) 伊紅染色:切片依次經(jīng)85%、95%梯度乙醇脫水,各5 min。然后進(jìn)入伊紅染液(醇溶)中染色5 min,經(jīng)兩次無水乙醇脫水各5 min;

(5) 透明:切片再經(jīng)新鮮無水乙醇脫水5 min,二甲苯透明5 min,更換新鮮的二甲苯再透明5 min。

(6) 封片:滴加中性樹膠進(jìn)行封片。

注意事項(xiàng)

1. 染色后用特定溶液將組織中過多結(jié)合的染液脫去,這個過程稱為分化作用,所用溶液稱為分化液。在HE染色種常用低濃度鹽酸作為分化液,因?yàn)樗崮芷茐奶K木素的醌型結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu),使色素與組織分離而褪色。組織在經(jīng)蘇木素染色后,必須經(jīng)過分化去除組織中過多結(jié)合及非特異性吸附的染料,才能進(jìn)行伊紅染色,確保細(xì)胞核與胞漿顯色分明。可使用78NB10002蘇木素分化液。分化過程中,根據(jù)組織切片厚度、組織類型等結(jié)合鏡下觀察適當(dāng)調(diào)整分化時間。


2. HE染色中蘇木素染色后的返藍(lán)很重要。蘇木素在酸性條件下為離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性分化液分化后呈紅色或粉紅色,需立即水洗終止分化,再用弱堿性溶液使蘇木素,這個過程就是返藍(lán)作用。如果沒有專用的返藍(lán)液,用溫水浸洗也能使細(xì)胞核返藍(lán),只是所需時間略長。推薦78NB10003蘇木素返藍(lán)液。

3. 蘇木素及伊紅染色程度可以根據(jù)染色需要進(jìn)行調(diào)整染色時間。

4. 蘇木素染液可重復(fù)使用多次,每次用完后需密封保存,防止有效成分揮發(fā)。當(dāng)組織或細(xì)胞著色明顯偏淺或顏色異常時請更換新的染液。

5. 用于染色后脫水的無水乙醇純度需大于99.9%。如果乙醇含水,伊紅會褪色導(dǎo)致染色不均勻。

6. 伊紅染液(醇溶)可反復(fù)使用數(shù)次,當(dāng)組織著色明顯偏淺時建議更換新的染液。

7. 操作時請穿實(shí)驗(yàn)服,佩戴一次性手套。



貨號品名規(guī)格品牌
78GD10081-100mLHE染液100mLBIOHUB
78GD10081-500mLHE染液500mLBIOHUB




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